日韩一区二区三区视频久久_中文字幕1区久久_高跟美女被肏,网站欧洲精品_日日躁夜夜躁AAAAXXXX_一区二区三区三级18岁看的_先锋资源家庭乱伦_亚洲国产精品无码AV在线_熟女专区AV,国产精品午夜小视频观看,色婷婷777国产偷窥盗摄精品,外企少妇无奈献身老外

千舍生物

讓實(shí)驗(yàn)更省心!

服務(wù)熱線:15371470969

技術(shù)文章

ARTICLE

當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章貼壁細(xì)胞接收注意

貼壁細(xì)胞接收注意

更新時(shí)間:2025-09-25點(diǎn)擊次數(shù):158

貼壁細(xì)胞接收注意事項(xiàng)


貼壁細(xì)胞經(jīng)過快遞運(yùn)輸顛簸會(huì)出現(xiàn)漂浮脫落等情況: 收到先放培養(yǎng)箱靜置穩(wěn)定。如有脫落需收集處理,處理細(xì)節(jié)請(qǐng)查閱以下信息,原瓶內(nèi)為運(yùn)輸培養(yǎng)液,血清含量只有5%,需及時(shí)更換專用wan全培養(yǎng)基。

收到細(xì)胞后請(qǐng)把細(xì)胞圖片狀態(tài)發(fā)到群, 根據(jù)圖片可以給出接下來的處理建議(傳代或者換液),建議一比二傳代至2個(gè)T25。 

貼壁細(xì)胞傳代步驟: 準(zhǔn)備工作:胰酶和wan全培養(yǎng)基(需要提前37度復(fù)溫)、PBS(常溫)避免細(xì)胞遇冷受刺激

1) 吸出原培養(yǎng)液

2) 加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄

3) 加入1ml左右0.25%含EDTA的胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。貼壁細(xì)胞傳代步驟: 準(zhǔn)備工作:胰酶和wan全培養(yǎng)基(需要提前37度復(fù)溫)、PBS(常溫)避免細(xì)胞遇冷受刺激

1) 吸出原培養(yǎng)液

2) 加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄

3) 加入1ml左右0.25%含EDTA的胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。

4) 根據(jù)不同的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱時(shí)及時(shí)關(guān)注消化時(shí)間,消化約2-3min,顯微鏡下看到細(xì)胞中間的細(xì)胞明顯分離變圓細(xì)胞間隙變大,顯微鏡下看細(xì)胞呈單個(gè)游離狀態(tài),側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化,可以輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)身。(消化時(shí)主要看消化狀態(tài),如果沒有變圓,側(cè)立時(shí)不能滑落時(shí),可以適當(dāng)延長消化時(shí)間,每30s觀察一次細(xì)胞)

5) 加入3ml含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)輕輕吹打(不要太用力)使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。

6) 收集細(xì)胞懸液離心,1000rpm/min(約250g) 5分鐘,離心完吸出上清丟棄。

7) 加入新鮮wan全培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按需接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足wan全培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。

8) 檢查培養(yǎng)箱二氧化碳,溫度和水盤。

這個(gè)是貼壁細(xì)胞傳代的方法,特別注意的是第4步消化過程,消化至到細(xì)胞wan全變圓以后側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以出現(xiàn)滑落時(shí)再終止消化。

消化到這樣的成游離狀態(tài),后續(xù)輕輕稍微吹一下即可很好的分散細(xì)胞

后續(xù)處理建議:傳代后2-3天換液一次即可,(如細(xì)胞第二天全部貼壁培養(yǎng)基顏色變黃,可以換液,)無需每天換液(換液太勤可能會(huì)損失細(xì)胞影響細(xì)胞狀態(tài))換液時(shí)候如果沒有特殊情況也可以不用PBS清洗

4) 根據(jù)不同的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱時(shí)及時(shí)關(guān)注消化時(shí)間,消化約2-3min,顯微鏡下看到細(xì)胞中間的細(xì)胞明顯分離變圓細(xì)胞間隙變大,顯微鏡下看細(xì)胞呈單個(gè)游離狀態(tài),側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化,可以輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)身。(消化時(shí)主要看消化狀態(tài),如果沒有變圓,側(cè)立時(shí)不能滑落時(shí),可以適當(dāng)延長消化時(shí)間,每30s觀察一次細(xì)胞)

5) 加入3ml含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)輕輕吹打(不要太用力)使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。

6) 收集細(xì)胞懸液離心,1000rpm/min(約250g) 5分鐘,離心完吸出上清丟棄。

7) 加入新鮮wan全培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按需接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足wan全培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。

8) 檢查培養(yǎng)箱二氧化碳,溫度和水盤。

這個(gè)是貼壁細(xì)胞傳代的方法,特別注意的是第4步消化過程,消化至到細(xì)胞wan全變圓以后側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以出現(xiàn)滑落時(shí)再終止消化。

游離細(xì)胞.jpg


消化到這樣的成游離狀態(tài),后續(xù)輕輕稍微吹一下即可很好的分散細(xì)胞

后續(xù)處理建議:傳代后2-3天換液一次即可,(如細(xì)胞第二天全部貼壁培養(yǎng)基顏色變黃,可以換液,)無需每天換液(換液太勤可能會(huì)損失細(xì)胞影響細(xì)胞狀態(tài))換液時(shí)候如果沒有特殊情況也可以不用PBS清洗 。


返回列表
  • 服務(wù)熱線 15371470969
  • 電子郵箱

    1171206955@qq.com

  • 本司產(chǎn)品僅用于科研,不用于臨床診斷和治療

掃碼加微信

Copyright © 2025 蘇州千舍生物科技有限公司版權(quán)所有    備案號(hào):蘇ICP備20017200號(hào)-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    sitemap.xml

久久久亚洲精品午夜伦理| 国产精品99一区| 桃色日韩av在线观看| 日韩欧美视频在线观看一区| ?v久久亚洲欧美综合激情一区| 操你,com| 精品人妻少妇久久蜜臀av| 91羞羞影院无码一区二区 | 久久亚洲私人国产精品| 999性爱电影| 亚洲国产日韩?在线播放| 国产成人无码精品久久| 亚洲香av| 天堂亚洲在线精品| 国产精品熟女人妻| 虐待av一区二区三区| www.91黄色| 欧美日韩一区人妻| 欧美日韩国产码综合一区在线| 91无码福利导航视频| 97综合在线| 人妻熟女一二三区夜夜爱| 日本视频一区二区三区| 性无码欧美一级毛片| 精品噜噜噜免费人妻| 精品乱码一区二区| 亞欧搞黃視頻| 精品久久久久免费视频| 欧美人与动牲交免费看| 探花亚洲日本| 日韩高清无吗999| 性色αv国产精品久久久| 亚洲精品中文字幕无乱码| 可以看的性爱视频| 国产91视频熟女| 欧美国产在线精品国自产拍| 欧美日韩午夜乱伦视频| 导航无码不卡高清AV| 蜜桃在线无码精品秘 入口欧| 国产三级农村妇女在线| 婷婷五月天丁香天堂网|